由于在纽约自然历史博物馆担任警卫有出色表现，拉瑞（本·斯蒂勒 Ben Stiller 饰）出任某家电小公司的CEO，而且还在电视上接受了著名脱口秀主持人的访谈，儿子对他仰慕，爱情如影随形，一派春风得意的样子。不过，好景不长，当他故地重游，却意外发现馆长已经因为更新展览并准备把过时的展品挪到华盛顿的史密森博物馆继续展出。这让拉瑞感到有些气愤，他觉得自己有责任重振博物馆之雄风，于是他决定留下来再做一晚警卫，以唤起那些老朋友的共同努力。事实上，在搞定了罗斯福（罗宾·威廉斯 Robin Williams 饰）、林肯、拿破仑、伊凡雷帝和阿尔•卡邦等人之后，他遭遇了一个劲敌——邪恶的古埃及法老的卡门拉，二人在夜晚再度上演了博物馆的惊魂对决……
威尔·法瑞尔,约翰·C·赖利,丽贝卡·豪尔,拉尔夫·费因斯,休·劳瑞,凯莉·麦克唐纳,劳伦·拉普库斯,贝拉·拉姆齐,帕姆·费里斯,罗伯·布莱顿,基兰·奥布莱恩,诺亚·尤佩,迈克尔·卡尔金
安东尼·霍普金斯,布里吉特·方达,马修·布罗德里克,约翰·库萨克,达纳·卡维,迈克尔·勒纳,科尔姆·米尼,约翰·内威尔,拉腊·弗林·鲍尔,特蕾茜·林德,卡穆琳·曼海姆,罗伊·布罗克斯史密斯
艾迪·墨菲,乔恩·坦尼,乔依·特拉沃塔,Eugene Collier
邓飞,刘颺
Miley Cyrus,Alexis Knapp,凯莉·奥斯本 Kelly Osbourne
渥美清,倍赏千惠子,吉冈秀隆,后藤久美子,前田吟,池胁千鹤,夏木真理,浅丘琉璃子,美保纯,佐藤蛾次郎,出川哲朗,滨田麻里,桥爪功,Tamahei Hayashiya,北山雅康,小林稔侍,松野太纪,樱田日和,笹野高史,竹山隆范,田中壮太郎,立川志らく,富田望生
